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犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家

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犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家
上海聯(lián)祖生物相關(guān)產(chǎn)品:
ICD檢測(cè)試劑盒柱與柱之間吸附量差異極小,可重復(fù)性好

更新時(shí)間:2021-03-13
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注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

 產(chǎn)品名稱

 犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家

 英文名稱

 Mycoplasma haemocanisPCR

 貨號(hào)

 LZP7030

組成及試劑配制:
1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)
2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請(qǐng)臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時(shí)反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml。
?
實(shí)驗(yàn)過(guò)程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
三、注意事項(xiàng)
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個(gè)沒(méi)有DNA污染的干凈環(huán)境中進(jìn)行設(shè)立一個(gè)的PCR實(shí)驗(yàn)室。
2.純化模板所選用的方法對(duì)污染的風(fēng)險(xiǎn)有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡(jiǎn)單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒(méi)有核酸和核酸酶的污染。操作過(guò)程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過(guò)濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗(yàn)一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量?jī)?chǔ)存,從而確保實(shí)驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準(zhǔn)備過(guò)程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開(kāi),并且要充分混勻。
NCTC clone 929(小鼠成纖維)說(shuō)明書(shū)Anti-LRRTM2研究領(lǐng)域  免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 內(nèi)分泌病

人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基現(xiàn)貨供應(yīng)Anti-LRRTM4研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 b-淋巴細(xì)胞

豚鼠白介素2(IL-2)elisa試劑盒Anti-LZIC研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

大鼠骨髓來(lái)源內(nèi)皮祖細(xì)胞價(jià)格Anti-LGI3研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 細(xì)胞凋亡

DMEM/F12(不含HEPES,含雙抗)說(shuō)明書(shū)Anti-Lhx4研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 細(xì)胞凋亡

小鼠干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)elisa試劑盒Anti-LCA/Lens culinaris agglutinin研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué)

大鼠角膜成纖維細(xì)胞報(bào)價(jià)Anti-LHX6研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 細(xì)胞凋亡 線粒體

人腸微血管內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基價(jià)格Anti-LRRC2研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 淋巴細(xì)胞 t-淋巴細(xì)胞 b-淋巴細(xì)胞 表觀遺傳學(xué)

果膠酶實(shí)驗(yàn)步驟Anti-LRRC59研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué)

有機(jī)磷殘留試劑盒Anti-LRRC41研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 免疫學(xué) 染色質(zhì)和核信號(hào) 表觀遺傳學(xué)

豬前列腺素E2Elisa Kit說(shuō)明書(shū)Anti-C17orf82研究領(lǐng)域  神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)

小鼠胎盤泌乳素(PL)elisa試劑盒Anti-LRP15研究領(lǐng)域  腫瘤 心血管 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 脂蛋白 新陳代謝

人肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子(HGF)elisa試劑盒Anti-LACE1研究領(lǐng)域  腫瘤 細(xì)胞生物 免疫學(xué) 神經(jīng)生物學(xué) 信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

牡荊素3681-93-4 實(shí)驗(yàn)方法Anti-Elastin研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 干細(xì)胞 細(xì)胞類型標(biāo)志物 腫瘤細(xì)胞生物標(biāo)志物

轉(zhuǎn)基因植物Sad1基因PCR檢測(cè)試劑盒免費(fèi)代測(cè)Anti-LRRC4B/NGL3研究領(lǐng)域  腫瘤 免疫學(xué) 轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)因子 細(xì)胞粘附分子

川續(xù)斷皂苷VI;木通皂苷DIntegrin alpha 1  整合素α1抗原Transferrin receptor  轉(zhuǎn)鐵蛋白受體抗體

芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷;大波斯菊苷Integrin Alpha4 Beta7/LPAM-1 (Lymphocyte Peyer’s patch Adhesion Molecule 1/Integrin alpha4,beta7)  整合素α4β7抗原Transferrin  轉(zhuǎn)鐵蛋白抗體

遼東楤木皂苷VIntegrin AlphaE2/CD103  整合素αE2抗原Transcription factor 25/Nulp1  核轉(zhuǎn)錄因子25抗體

遼東楤木皂苷XENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3)  ENPP3抗原Transaldolase 1  轉(zhuǎn)酶抗體

遼東楤木皂苷VIIIQGAP1  支架蛋白抗原TRAK1  驅(qū)動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1抗體

阿魏酸乙酯IRF-1(Interferon regulatory factor-1)  干擾素調(diào)節(jié)因子抗原TRAILR2/DR5/CD262  腫瘤細(xì)胞調(diào)亡素/死亡受體5抗體

IRAK 2  白介素-1受體相關(guān)激酶2TRAILR1/DR4/APO2  死亡受體4抗體

茶堿IL-1RA (Interleukin-1 receptor antagonist)peptide  白介素-1受體拮抗劑抗原TRAIL  腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體抗體

D十-無(wú)葡萄糖Integrin a7(integrin alpha 7)  整合素α7抗原TRAF7  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子7抗體

脫穿心蓮內(nèi)酯integrin Beta1(ITG- Beta1/CD29)  粘附分子整合素β1抗原TRAF6  腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體
犬血支原體PCR檢測(cè)試劑盒廠家T細(xì)胞特異性鳥(niǎo)苷三磷酸酶(Tgtp)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

XC趨化因子受體1(XCR1)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃25克

α/β干擾素受體(IFN-α/βR)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT500支/包

α1β糖蛋白(α1β-GP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

α1抗胰蛋白酶(α1-AT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃5克

α1抗胰糜蛋白酶(AACT)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100克

α1酸性糖蛋白(α1-AGP)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:RT支

α1微球蛋白(α1-MG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克*5
檢測(cè)步驟:
一、 試劑的準(zhǔn)備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對(duì)照+1管陽(yáng)性對(duì)照),每個(gè)測(cè)試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個(gè)反應(yīng)加入的量 N個(gè)反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計(jì)算好各試劑的使用量,加入一適當(dāng)體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個(gè)PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對(duì)照(NTC)和陽(yáng)性對(duì)照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時(shí)離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴(kuò)增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時(shí)收集熒光信號(hào)。報(bào)告基團(tuán):設(shè)置為FAM。淬滅基團(tuán):NONE,請(qǐng)勿選擇ROX參比熒光。

 

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