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狂犬病病毒通用PCR檢測試劑盒說明書

產品簡介

狂犬病病毒通用PCR檢測試劑盒說明書
上海聯祖生物相關產品:
uE3檢測試劑盒價格:敬請客戶與我司取得獲取實時報價
服務:可提供免費代測服務,以及產品說明書和技術指導等

更新時間:2021-03-13
訪問次數:725
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組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

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 產品名稱

 狂犬病病毒通用PCR檢測試劑盒說明書

 英文名稱

 Rabies VirusRTPCR

 貨號

 LZP7211

實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物。可以是DNA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
Tin磷酸氫鈣,二 Ph. Eur., BP, USP, 98-102.5% 苯乙 95%

Tin羥基纖維素 2%粘度6mPa.s;甲氧基28-30%;羥基7.0-12%苯乙 95%

Tin羥基纖維素 2%粘度15mPa.s;甲氧基28-30%;羥基7.0-12%苯乙 ≥90%, FCC, Kosher, FG

Tin羥基纖維素 2%粘度50mPa.s;甲氧基28-30%;羥基7.0-12%苯乙 50%溶液

Tin(II) oxide羥基纖維素 2%粘度3mPa.s;甲氧基28-30%;羥基7.0-12%高氯酸 AR,99.5%

Tin(IV) oxide3-羧基環丁胺 98%高氯酸鈉,無  ACS, ≥98.0%

Tin(II) oxalate氮雜環丁烷鹽酸鹽 97%高氯酸鈉,無 99.99% metals basis

Tungsten1-二苯甲基-3-羥基氮雜環丁烷鹽酸鹽 96%高氯酸鈉,無 for HPLC,99.0%

Tungsten carbide二苯 97%高氯酸鈉,一 ACS, 98%

Tungsten(VI)oxide苯并呋喃酮 98%氯酸鈉 CP, ≥98.0%

Cerium(III) fluoride二苯烷 99%3-O-甲基-D-吡喃葡萄糖 99%

Cerium(IV) oxide2-羥基 99%過硫酸氫   ≥47% KHSO5 basis

Aluminum acetate basic3-羥基氮雜環丁烷鹽酸鹽 97%二甲氨酰氯 97%

Aluminum tristearate鄰羥基苯基苯酮 97%3-硝基-4-氨基苯酚  98%

Aluminum isopropoxide三苯烷 99%4-硝基鄰苯二胺 97%

Chromium三苯基氯 97%納米三氧化二鐵(α- Fe2O 30nm 球形,99.5%,α型

γ-氨基丁酸(GABA) ASC/TMS1 (E1E3I) Rabbit mAbPRRSV M protein  豬藍耳病病毒M蛋白抗體

γ-氨基丁酸(GABA),標準品Bcl-xL (54H6) Rabbit mAb (PE Conjugate)PRR15  富含脯氨酸蛋白15抗體

澳洲茄邊堿(標準品)Cell Health Assay KitPRR11  富含脯氨酸蛋白11抗體

澳洲茄堿(標準品)IL-17A (D1X7L) Rabbit mAb (Mouse Specific)PRPH2  外周蛋白2抗體

安格洛苷 C(標準品)SimpleChIP® Human FDPS Promoter PrimersPRPF4  PRPF4蛋白抗體

托瑞米芬Phospho-Akt (Thr308) (D25E6) XP® Rabbit mAb (PE Conjugate)prox1  prox-1抗體

托瑞米芬(標準品)p130 Cas (E1L9H) Rabbit mAbProtor-1  癌抑制基因Protor1抗體

來那替尼DNA Polymerase η (E1I7T) Rabbit mAbProtein Z  蛋白Z抗體

甲基原薯蕷皂苷(標準品)Phospho-ATF-2 (Thr71) (11G2) Rabbit mAb (PE Conjugate)Protein S/PROS  蛋白S抗體

纖細薯蕷皂苷(標準品)UNC5B (D9M7Z) Rabbit mAbProtein G  重組蛋白G抗體
狂犬病病毒通用PCR檢測試劑盒說明書人抑制素A(INH-A)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:5克

人抑制素B(INH-B)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:1克

人抑制素β-B(Inhbb)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:100毫克

人吲哚2,3-雙加氧酶(IDO)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃,避光10克

人優球蛋白(EL)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50毫克

人幽門螺桿菌細胞毒素相關基因蛋白A-IgG(HP-CagA-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:50克

人幽門螺旋桿菌IgM(Hp-IgM)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:25毫升

人幽門螺旋菌IgG(Hp-IgG)ELISA試劑盒  *shēng huà shì jì  容量:2~8℃1克

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