產(chǎn)品屬性：

需要而未提供的試劑和器材：

1. 產(chǎn)品僅用于科研標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀

2. 高速離心機(jī)

3. 電熱恒溫培養(yǎng)箱

4. 干凈的試管和Eppendof管

5. 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測(cè)樣品較多時(shí)，用多通道移液器

6. 蒸餾水，容量瓶等。

標(biāo)本要求：

1．標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn)，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。

2．不能檢測(cè)含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的（HRP）活性。

備試劑與收集血樣：

1.  收集標(biāo)本：血清、血漿（EDTA 、檸檬酸鹽、肝素抗凝）、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè)， 2-8 ℃ 保存48 小時(shí)；更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍（ -20   ℃或 -70   ℃ ）保存，避免反復(fù)凍融。

2.  標(biāo)準(zhǔn)品液配制：使用前加入0.5ml 蒸餾水 混勻，配成 120 0ng/ml 的溶液 。 設(shè)標(biāo)準(zhǔn) 管 8 管，管加標(biāo)本稀釋液 900ul ，第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的標(biāo)準(zhǔn)品溶液 100ul 混勻后用加樣器吸出 500ul ，移至第二管 。如此反復(fù)作對(duì)倍稀釋?zhuān)瑥牡谄?管 中吸出 500ul 棄去。第八 管 為空白對(duì)照。

3.  10× 標(biāo)本稀釋液用蒸餾水作 1: 1 0 倍稀釋?zhuān)?示例： 1ml濃稀釋液 +9ml 蒸餾水）。

4.  洗滌液：用重蒸水 1:20 稀釋?zhuān)ㄊ纠?ml 濃縮洗滌液加入 19ml 的重蒸水）

檢測(cè)程序：

1.  加樣：每孔各加入標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品 100ul ，將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。

2.  洗板：用洗滌液將反應(yīng)板充分洗滌 4-6 次，向?yàn)V紙上印干。

3.  每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應(yīng)板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。

4.  洗板：同前。

5.  每孔加酶標(biāo)抗體工作液100ul 。將反應(yīng)板置 37 ℃ 3 0 分鐘。

樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備：

ELISA試劑盒液體樣本：包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。

（1）血清

室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（2）血漿：

應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（3）尿液：

用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。

（4）細(xì)胞培養(yǎng)上清：

檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。

（5）培養(yǎng)細(xì)胞

檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

（6）組織標(biāo)本

切割標(biāo)本后，稱(chēng)取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè)，其余冷凍備用。

豬生存素(Surv)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒聚氧乙烯EL2,6-二酚標(biāo)準(zhǔn)溶液 1000μg/ml，溶劑：氧化鈰 99.9% metals basis，黃色

豬泛素結(jié)合E2C(UBE2C)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  聚氧乙烯EL乙酰乙乙酯 AR,98%氧化鈰 20nm 球形，99.5%

豬甘露糖受體C2 (MRC2)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 1，1-二苯-2-苦肼硫羥 AR,99.0%氧化鈰 99.95% metals basis ,白色

豬Ⅸ(F9)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒1，1-二苯-2-苦肼對(duì)苯二酚 AR氧化鈰 99.95% metals basis，<50 nm (BET)

豬信號(hào)傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子4(STAT4)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒白藜蘆乙酰乙異丁酯 98%氧化鈰 99.9% metals basis，<100 nm (BET)

豬絲裂原激活蛋白激(MAPK)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 白藜蘆 AR,98.0%（劇品）氧化鈰 99.99%

豬端粒相關(guān)蛋白1(TEP1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒2-硫脲嘧啶 AR，99.8%氟化鈣 CP,98.0%

豬八聚體轉(zhuǎn)錄因子2B(OTF2B)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2-硫脲嘧啶 CP，99.5%氟化鈣 AR,99.5%

豬血管生成素樣蛋白1(ANGPTL1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  2,4,6-三吡啶三 SP氟化鈣 光譜純

豬16α羥雌1(16-α OHE-1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2,4,6-三吡啶三 99.99% metals basis氟化鈣 99.99% metals basis

豬狀腺激素自身抗體(THAA)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 2,4,6-三吡啶三 ACS, ≥99.8%硫銫 AR,99.5%

豬鳥(niǎo)氨脫羧(ODC)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雌二 99.995% tmetals basis硫銫 99.9%

豬軸突生長(zhǎng)誘向因子1(Ntn1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雌二標(biāo)準(zhǔn)溶液 0.05000mol/L (0.1N)碳銫 99.99% metals basis

豬還原(GR)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒雌二2,6-二吡啶 98%碳銫 AR，99% metals basis

豬磷脂Cγ1(PLCγ1)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒 雌二2,6-二吡啶 分析標(biāo)準(zhǔn)品，≥99.5% (GC)碳銫 99.9% metals basis

豬嗜環(huán)蛋白/親環(huán)素B(CYPB)聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒  對(duì)苯二氧化錳 CP,72%鍺粉 99.999% metals basis，1mm
lyso-PAF溶血血小板活化因子ELISA試劑盒英文名稱(chēng)：DUBs-IN-2

產(chǎn)品規(guī)格：1mL(10mM)|2mg|5mg|10mg|50mg|100mg

DUBs-IN-2是一種有效的deubiquitinase抑制劑，能夠抑制USP7/USP8的活性，IC50值分別為7.2μM/0.93μM。

注：本品僅可用于科研實(shí)驗(yàn)，嚴(yán)禁用于臨床醫(yī)療及其他用途！

*：924296-19-5

純度：99.08%

分子量：275.26

結(jié)構(gòu)式：

DUBs-IN-2結(jié)構(gòu)式

儲(chǔ)存條件：-20℃，有效期2年，溶入溶劑后-20℃請(qǐng)盡量在一個(gè)月內(nèi)使用。

操作步驟：

1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋?zhuān)罕驹噭┖刑峁┰稑?biāo)準(zhǔn)品一支，用戶(hù)可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。

2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl，待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測(cè)樣品10μl（樣品最終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dòng)混勻。

3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4.配液：將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。

5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。

6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。

7.溫育：操作同3。

8.洗滌：操作同5。

9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色）。

11. 測(cè)定：以空白空調(diào)零，450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度（OD值）。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以?xún)?nèi)進(jìn)行。