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人巨細胞病毒PCR檢測試劑盒廠家

產品簡介

中文名:12-羥基茉莉酸別名:分子式:C12H18O4

麥角蛋白抗體3-(Hydroxymethyl)cyclopental中文名:別名:分子式:C6H12O2

膠質瘤發病相關蛋白1抗體Decanedioic a

更新時間:2021-03-13
訪問次數:705
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產品名稱

 人巨細胞病毒PCR檢測試劑盒廠家

 規格

 50T

 貨號

 LZP7766

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
苊(標準品)Spry2 (D3G1A) Rabbit mAb(三氟甲基)(基)硫脲

鋁標準溶液(1000μg/ml,介質:1.0 mol/L HNO3)Nanog (D73G4) XP® Rabbit mAb (PE Conjuga)異-2,二羥-1,雙二基膦丁烷

鋁標準溶液(100µg/mL,基體:5%HCl)p95/NBS1 (D6J5I) Rabbit mAb基己基三酮

甲(標準品)HCN2 (D1C6I) Rabbit mAb芐氧基酸

鄰二甲酸二丁氧基酯(標準品)Rpb1 NTD (D8L4Y) Rabbit mAb7-氟吲哚

三聚酸(標準品)CGRP (D5R8F) Rabbit mAb2,二甲基-吡啶-N-氧化物

(+/-)-兒茶精(標準品)CGRP (D5R8F) Rabbit mAb硝基肉桂

鄰二甲酸二庚酯(標準品)EphB4 (D1C7N) Rabbit mAb2--氨基吡啶

反油酸(標準品)Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb甲基糠基二硫

十七碳酸(標準品)Sox2 (D1C7J) XP® Rabbit mAb氨基-溴吡啶

十七碳酸(98%)PROX1 (D2J6J) Rabbit mAb酯

隱色孔雀石綠(標準品)Phospho-CDCP1 (Tyr743) (D2G2J) Rabbit mAb6-溴-氮雜吲哚

二十酸甲酯(標準品)VPRBP (D5K5V) Rabbit mAb2-氨基-基噻吩-羧酸酯

蓖麻油酸甲酯(標準品)α-Smooth Muscle Actin Antibody環戊基酸

甲酸甲酯(標準品)CXCL10 (D5L5L) Rabbit mAb2,二酸

亞硫酸氫鈉甲萘醌(標準品)IFI16 (D8B5T) Rabbit mAb氧基-叔丁基-二甲基硅烷

山崳酸甲酯(標準品)TIM-1 (E1R9N) Rabbit mAb-2-硝

己酸甲酯(標準品)β-Amyloid (1-42 Specific) (D9A3A) Rabbit mAb一二氟酮

超敏C反應蛋白(hs-CRP)ELISA試劑盒IL-13  白介素13100 ul

超酸化微管相關蛋白tau(hyper phosphorylad MAPT)ELISA試劑盒IL-14/Taxilin alpha  白介素14100 ul

腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA試劑盒IL-15RA  白介素15受體α100 ul

腸三葉因子(ITF)ELISA試劑盒IL-15  白介素15100 ul

腸道病毒71型(EV71)(IgM)ELISA試劑盒IL-16  白介素16100 ul

層粘連蛋白亞基γ-2(LAMC2)ELISA試劑盒IL-13Ra1  白細胞介素-13受體a1100 ul

層粘連蛋白β1(LN-β1)ELISA試劑盒IL-13Ra2  白細胞介素-13受體a2100 ul

層粘連蛋白-5(LN-5)ELISA試劑盒IL-16/LCF  白介素-16100 ul

層連蛋白/板層素(LN)ELISA試劑盒IL-17 (mouse, rat)  白介素-17(,)20 ul
人巨細胞病毒PCR檢測試劑盒廠家腎小球上皮蛋白1抗體3-(Hydroxymethyl)cyclopentane中文名:別名:分子式:C6H10O2

轉錄因子Gli4/鋅指蛋白gli4抗體12-Hydroxyjasmonic acid中文名:12-羥基茉莉酸別名:分子式:C12H18O4

麥角蛋白抗體3-(Hydroxymethyl)cyclopental中文名:別名:分子式:C6H12O2

膠質瘤發病相關蛋白1抗體Decanedioic acid中文名:別名:Sebacic acid分子式:C10H18O4

糖基轉移酶25結構域1/前膠原半乳糖基轉移酶1抗體2-(2'-Hydroxytetracosaylami)-octadecane-1,3,4-triol tetraacetate中文名:別名:分子式:C50H939
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環條件:
1循環 50℃ for 2 min
預變性 1循環 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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