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小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒說明書

產(chǎn)品簡介

定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒CHRNA2(neuronal) 煙型酰膽受體A2(神經(jīng)型)100 ul

AT豐富結合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒*/NADPH oxidase 1 有絲分裂氧化酶1100 ul

Apelin ELISA試劑盒Nox3/NADPH oxidase 3 有絲分裂氧化酶2100 ul

Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒N

更新時間:2021-03-13
訪問次數(shù):750
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注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。

 產(chǎn)品名稱

 小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒說明書

 規(guī)格

 50T

 貨號

 LZP7839

組成及試劑配制:
1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer             5μl
dNTP mixl                 4μl
引物1(10pM)               2μl
引物2(10PM)              2μl
Taq酶(2U/μl)            1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl)    1 μl
ddH2O至               50 μl
PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應應該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應戴手套。
4.PCR試劑配制應使用zui高質量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應在冰浴上化開,并且要充分混勻。
(農(nóng)殘級,≥99.9%,,含50-150ppm戊穩(wěn)定劑)DLL1 AntibodyN-亞硝基新煙草

1,二氧六環(huán)(農(nóng)殘級)DLL1 Antibody基四氫吡喃

化銫(用于高通量質譜,99.9995%)DLL4 Antibody氟吡啶

(for HPLC, ≥99.5%)DLL4 Antibody(R)-(+)--1-基-1-

1,二甲基-2-咪唑啉酮(用于GC-HS,≥99.8%(GC))SirT6 AntibodyN-甲基對

二甲基亞砜(農(nóng)殘級)Myoglobin (D2F5X) Rabbit mAb對基

鄰二甲酸二甲酯(色譜固定液)Acetyl-Histone H4 (Lys12) Antibody氧基酸酯

十二烷基*基化銨(DTAC)(99%,離子對色譜級)Histone H4 Antibody2,5-二

正庚烷(農(nóng)殘級,≥99%(GC))Evi-1 (C50E12) Rabbit mAb馬布臺諾

(農(nóng)殘級,≥99.8%)SimpleChIP® Human ZNF335 Promor Primers1-基-1,2-二酮

異辛烷(農(nóng)殘級,>99.5%(GC))Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody1,5-二甲基-1H-吡唑-

(色譜固定液,30℃)Acetyl-Histone H4 (Lys8) Antibody2,2'-二吡啶甲基

(for HPLC,≥99.9%)Histone H2A.X AntibodyDL-羥基丁酸鈉

(農(nóng)殘級, ≥99.9%)Galectin-9 (D9R4A) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)間甲

(LC-MS,≥99.9%)Naked2 (C36D3) Rabbit mAb2-甲氧基

二十酸甲酯(分析標準品,≥99.0% (GC))NUP98 (C37G10) Rabbit mAb-6-三氟甲基噠

甲基異丁酮(for HPLC,≥99.5%)NUP98 (C39A3) Rabbit mAb(R)-2-甲基-CBS-惡唑烷

(農(nóng)殘級,99.9%)NUP98 (C39A3) Rabbit mAb2,3,4,5,6-五氟甲酸

A組鏈球菌菌壁多糖(ASP)ELISA試劑盒CHRNA4  煙型酰膽受體α4100 ul

A組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒CHRNA7  煙型酰膽受體α7100 ul

A激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒CHRNA2(neuronal)  煙型酰膽受體A2(神經(jīng)型)100 ul

AT豐富結合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒/NADPH oxidase 1  有絲分裂氧化酶1100 ul

Apelin ELISA試劑盒Nox3/NADPH oxidase 3  有絲分裂氧化酶2100 ul

Apelin 36(AP36)ELISA試劑盒NOX4/NADPH oxidase 4  NADPH氧化酶NOX家族的成員420 ul

apelin 13(AP13)ELISA試劑盒Nanog  胚胎干細胞關鍵蛋白100 ul

apelin 12(AP12)ELISA試劑盒NAIF1 proin  核凋亡誘導因子蛋白1100 ul

AP-5復合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒Natrexone  抗納曲酮IgG100 ul
小反芻獸疫病毒PCR檢測試劑盒說明書BEND3蛋白抗體7,4'-Di-O-methylapigenin 5-O-xylosylglucoside中文名:別名:分子式:C28H32O14

BEND4蛋白抗體Lethedioside A中文名:別名:分子式:C29H34O15

BEND6蛋白抗體3-Deoxysappane B中文名:別名:分子式:C16H14O5

立即早期癌基因BRLF1抗體(鼻咽癌基因)7-O-Methyleriodictyol中文名:7-O-甲基圣草酚別名:Sternbin分子式:C16H14O6

染色體相關蛋白H抗體Isosativan中文名:別名:7-O-Methylvestitol分子式:C17H18O4
檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設所需要的PCR反應管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
熒光PCR反應液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應條件
將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

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