注意事項：
     盡管經(jīng)測試Annexin V-FITC反復凍融5次對于其檢測效果無顯著影響，但為取得良好的使用效果，3-6個月內(nèi)推薦4℃保存，并適當注意避免反復凍融。
     如果有細菌或真菌污染，會嚴重影響檢測效果。
     染色后宜盡快檢測，時間過長可能會導致凋亡或壞死細胞的數(shù)量增加。
     如果細胞收集過程中使用了胰酶，需注意設法去除殘留的胰酶。殘留的胰酶會消化并降解Annexin V-FITC，導致染色失敗。
     熒光物質(zhì)均易發(fā)生淬滅，在進行熒光觀察時，盡量縮短觀察時間，同時在操作和存放過程中也盡量注意避光保存。
     用于流式細胞儀檢測時，如果發(fā)現(xiàn)Annexin V-FITC單獨染色時出現(xiàn)了過多的PI假陽性細胞，并且通過調(diào)整相關設置和參數(shù)也無法改善，可以用PBS將Annexin V-FITC稀釋3-10倍后再進行檢測，這樣通?？梢杂行p少假陽性的壞死細胞。
     需自備PBS。
     本產(chǎn)品于專業(yè)人員的科學研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
     為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。
產(chǎn)品名稱：胚肺成纖維細胞；hfl-I
英文簡稱：hfl-I細胞

貨號：LZ-X968365
規(guī)格：T25
生長特性：貼壁生長

我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌；部分產(chǎn)品現(xiàn)貨，公司產(chǎn)品僅用于科研超低比價，產(chǎn)品貨期短，價格優(yōu)，售后齊全。

凍存培養(yǎng)基：
凍存細胞時必須使用推薦的凍存培養(yǎng)基。凍存培養(yǎng)基中應含有 DMSO 或者甘油等冷凍保護劑。還可使用專門配制的*凍存培養(yǎng)基。
1）細胞凍存培養(yǎng)基是一種用于哺乳動物細胞的即用型*凍存培養(yǎng)基，其所含胎牛血清和牛血清比例經(jīng)過優(yōu)化，可改善細胞活力以及解凍后的細胞復蘇效果。 
2）凍存培養(yǎng)基是一種化學成分確定的、無蛋白、無菌凍存培養(yǎng)基，含10% DMSO，適用于多種干細胞和原代細胞 (黑色素細胞除外) 的凍存。
培養(yǎng)細胞凍存方案：
以下實驗方案介紹了培養(yǎng)細胞凍存的一般流程。詳細的實驗方案，必須參閱針對具體細胞的產(chǎn)品說明書。 
1.配制凍存培養(yǎng)基，于2°C至8°C下儲存，直至使用。請注意使用何種凍存培養(yǎng)基取決于所用細胞系。
2.凍存貼壁細胞時，利用傳代時所用方法輕柔地使細胞從組織培養(yǎng)容器上脫離下來。用該細胞所需*培養(yǎng)基重新懸浮細胞。
3.采用、細胞計數(shù)儀按照臺盼藍拒染法或者使用自動細胞計數(shù)儀測定總細胞數(shù)和活細胞百分比。根據(jù)所需活細胞密度，計算凍存培養(yǎng)基需要量。
4.以大約100-200×g的離心力將細胞懸液離心5至10分鐘。在無菌條件下小心倒掉上清液，不要攪動細胞沉淀。
注：離心速度和時間取決于細胞種類。
5.用預冷的凍存培養(yǎng)基重新懸浮細胞沉淀，將其調(diào)整至該細胞適合的活細胞密度。
6.將細胞懸液分裝到若干凍存管中。分裝時，應不時輕輕混合細胞，使其保持均勻的細胞懸液狀態(tài)。
7.使用可控制降溫速度的冷凍裝置冷凍細胞，使溫度每分鐘大約降低  1°C?；蛘?，將裝有細胞的凍存管放入凍存盒中，然后將凍存盒置于-80°C條件下過夜。

實驗報告：
一、分離與培養(yǎng)：
   1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
   2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 胰酶和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；
   3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織*被消化；
   4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
   5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；
二、免疫熒光鑒定：
   1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；
   2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；
   3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；
   4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；
   5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；
   6、用PBS沖洗3次，每次10min，最后在倒置熒光顯微
鏡下觀察圖像并拍照。
實驗材料： 
1. 50ml 配制好的RPMI1640培養(yǎng)液1瓶；8ml小牛血清（FCS) 1瓶；100ml 0.25%胰蛋白酶 1瓶；PBS(-)1 瓶 
2. 100ml滅菌燒杯2個；
3、50ml離心筒2個 
4、滅菌培養(yǎng)皿1個，細胞培養(yǎng)瓶1個 
5、1ml ，200μl移液器各1支；槍頭盒2個；無菌玻璃攪拌棒1個 
6、細胞計數(shù)板1塊； 
7、滅好菌的鑷子1把，剪刀1把； 
8、酒精燈1臺；

綿羊G蛋白偶聯(lián)受體家族C5組成員(GPRC5A)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(R)-(-)-3-哌啶乙酯湖泊微桿菌拉丁屬名: Brevundimonas  bullata

綿羊聚集蛋白聚糖(AGC)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (R)-(-)-3-哌啶乙酯缺陷假單胞菌用途: 研究

綿羊凝血酶敏感蛋白1(TSP1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒(R)-(-)-3-哌啶乙酯新月彎孢拉丁屬名: Bacillus subtilis

綿羊前蛋白轉(zhuǎn)化酶枯草溶菌素9(PCSK9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 (R)-(-)-3-哌啶乙酯枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Arcanobacterium haemolyticum

綿羊胸腺五肽(TP5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Thionin perchlorate溶血隱秘桿菌用途: 與胡枝子共生固氮

綿羊質(zhì)金屬蛋白酶-10(MMP-10)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒噻吩并[3,2-b]噻吩慢生根瘤菌注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

綿羊肝臟糖原磷化酶(PYGL)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒M344四川散斑殼注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

綿羊β乳球蛋白(β-Lg)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒反式-2,4-癸二烯中國擬迷孔菌拉丁屬名: Penicillium polonicum

綿羊周期素依賴性激酶5(CDK5)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 反式-2,4-癸二烯波蘭青霉拉丁屬名: Comamonas testosteroni

綿羊γ干擾素誘導單核因子(MIγ/CXCL9)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒反式-2,4-癸二烯叢毛單胞菌用途: 糖化力強

綿羊生長激素誘導跨膜蛋白(GHITM)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒聚（乙烯共聚馬來）日本根霉注意事項: 僅用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的，不可用于類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

綿羊凋亡相關因子(FAS/CD95/TNFRSF6)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 聚（乙烯共聚馬來）香菇拉丁屬名: Bacillus sporothermodurans

綿羊血管緊張素I(ANG I)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 環(huán)丁耐熱芽孢芽孢桿菌拉丁屬名: Pichia anomala

綿羊多巴(DA)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 環(huán)丁異常畢赤酵母拉丁屬名: Bacillus subtilis

綿羊組織因子(TF)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒環(huán)丁枯草芽孢桿菌拉丁屬名: Bacillus  cereus

綿羊分泌型卷曲相關蛋白2 (SFRP2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒二異蠟狀芽孢桿菌用途: 在無機鹽培養(yǎng)中以50mg/l的吡蟲啉為碳源培養(yǎng)，6天內(nèi)吡蟲啉降解率30%左右
hfl-I細胞雞角膜鎖鏈蛋白(CDSN)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-ER- Alpha/FITC  熒光素標記雌激素受體α抗體IgG

雞中間α球蛋白抑制因子H4(ITIH4)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-ER-alpha/FITC  熒光素標記雌激素受體抗體IgG

雞葡萄糖轉(zhuǎn)運蛋白1(GLUT1)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-ER- Alpha/FITC  熒光素標記雌激素受體α抗體IgG

雞轉(zhuǎn)錄激活因子-2(ATF-2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-ER- Alpha(phospho-S167)/FITC  熒光素標記抗人磷酸化雌激素受體α抗體IgG

雞脫氧核糖核酸酶I(DNase-I)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒 Anti-ER- Alpha/ Beta /FITC  熒光素標記雌激素受體α/β抗體IgG

雞成纖維生長因子受體底物2(FRS2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-NR1D1/REV-ERB alpha/FITC  熒光素標記核受體Rev-Erbα抗體IgG

雞粘蛋白17(MUC17)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-Phospho-REV-ERB alpha (Ser55/59)/FITC  熒光素標記磷酸化核受體Rev-Erbα抗體IgG

雞早期生長應答蛋白2(EGR2)酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒Anti-ER- Beta/FITC  熒光素標記雌激素受體β抗體IgG